细胞增殖的常见方法汇总及具体步骤
2024-07-12 来自: 长沙东晟生物技术有限公司 浏览次数:64
MTT即噻唑蓝,是一种可接受氢离子的黄 色有机化合物,可以被活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶和细胞 色素C还原为不能溶于水的蓝紫色产物甲臜。该产物虽然不溶于水,但溶于DMSO,DMSO将该物质完全溶解后,根据570 nm处的吸光度来反应细胞增殖/毒性情况。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
CCK-8法,也有人称该法是MTT法升级版。使用的是WST-8(一种类似于MTT的化合物),它在电子耦合试剂的作用下可以被活细胞线粒体内的脱氢酶还原为高度水溶性的橙黄 色甲臜(Formazan), 对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
EdU是一种新型胸苷类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction),通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。