热点分享 | 中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）Ⅰ

哈喽，本周小编为大家带来热点分享——中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）。我们将从三个方面为大家介绍：NETs概述、NETs检测方法、设计思路，希望对各位的科研之路有所帮助！

1.NETs概述

中性粒细胞胞外诱捕网（Neutrophil Extracellular Traps，NETs）是中性粒细胞在激活状态下释放的一种由DNA、组蛋白和颗粒蛋白组成的网状结构。这些网状结构能够捕获和杀死病原体，是中性粒细胞发挥免疫防御作用的一种重要方式。

NETs 的主要成分包括DNA纤维、组蛋白（如H1、H2A、H2B、H3和 H4）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、髓过氧化物酶（MPO）、组织蛋白酶G（CatG）、乳铁蛋白等。

2.NETs发生机制

中性粒细胞受到刺激后，会发生一系列的细胞内变化，导致 NETs 的形成。这个过程主要包括以下几个步骤：

激活信号：中性粒细胞可以通过多种途径被激活，如病原体相关分子模式（PAMP）、损伤相关分子模式（DAMP）、细胞因子等。这些信号可以激活中性粒细胞表面的受体，如 Toll 样受体（TLR）、补体受体等，从而启动 NETs 的形成过程。

核膜解体：激活的中性粒细胞会发生核膜解体，染色质解聚并与颗粒蛋白混合。

释放NETs：中性粒细胞将解聚的染色质和颗粒蛋白释放到细胞外，形成 NETs。这个过程中，中性粒细胞的细胞膜也会发生破裂，以允许 NETs 的释放。

3.NETs与疾病的关系

NETs在多种疾病的发生发展中起着重要的作用，包括炎症性疾病、自身免疫性疾病、心血管疾病和肿瘤等。

炎症性疾病：在感染和炎症过程中，NETs 可以捕获和杀死病原体，但过度的 NETs 形成可能导致炎症反应的持续和加重。例如，在脓毒症中，NETs 的过度释放可能导致器官损伤和功能障碍。

自身免疫性疾病：NETs中的一些成分，如DNA、组蛋白和颗粒蛋白等，可能成为自身抗原，引发自身免疫反应。例如，在系统性红斑狼疮（SLE）中，NETs 的存在与疾病的活动度相关，可能参与了免疫复合物的形成和沉积。 

心血管疾病：NETs与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。NETs可以促进脂质沉积、炎症细胞的募集和血管内皮细胞的损伤，从而加速动脉粥样硬化的进程。

4.NETs在肿瘤进展和转移中的作用

中性粒细胞渗透肿瘤，被认为是肿瘤转化、肿瘤进展、血管生成和免疫反应调节的关键介质。近年来，已有大量研究表明，NETs参与了肿瘤的发生、进展、转移以及与癌症相关的血栓形成。值得关注的是NETs可以促进炎症，但一些研究人员也开始强调NETs的抗 炎作用，如NETs可以通过降解细胞因子和趋化因子来抑制炎症。NETs在癌症中具有双重作用，在不同类型和不同阶段的癌症中，NETs的变化是起到促肿瘤或是抗肿瘤的作用，取决于免疫系统的状态以及肿瘤微环境的相互作用。

细胞焦亡检测方法

1.NETs形态学检测

NETs是纤维网状结构，这种结构在显微镜下呈现出松散的、类似蜘蛛网的形态，能够覆盖较大的区域，以便捕获病原体；

附着颗粒蛋白，组蛋白和颗粒蛋白如髓过氧化物酶（MPO）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、组织蛋白酶 G等附着在DNA 骨架上；

在释放NETs的过程中，细胞通常会失去其典型的多叶核形态，变得较为扁平，并且细胞膜会逐渐破裂。

2.NETs免疫荧光染色

3.NETs的DNA定量检测

通过ELISA试剂盒检测MPO-DNA复合体确定血清NETs水平（图AB）；通过共聚焦免疫荧光DNA，Cit-H3和MPO观察NETs水平（箭头指向细胞外NETs），统计了总的MPO+ CitH3和细胞外NETs阳性区域。

NETs的检测和定量

为了更好地研究 NETs 在疾病中的作用，需要建立准确、可靠的 NETs 检测和定量方法。目前，常用的检测方法为免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验（ELISA）、流式细胞术等。

研究热点包括开发新的检测技术，提高检测的灵敏度和特异性，以及建立标准化的检测方法，以便在不同的实验室之间进行比较和验证。