腺相关病毒及其应用

AAV外部呈现20面体结构，直径约26nm，AAV 的基因组约 4700bp，包括上下游两个开放读码框架(ORF)，位于分别由 145个核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。基因组中有 3个启动子(P5、P19 和 P40) 和 2个开放阅读读框(ORF)，rep 和 cap。rep 编码 4个重叠的多功能蛋白，即 Rep78、Rep68、Rep52 和 Rep40，其中 Rep78 与 Rep68 参与 AAV 的复制与整合，Rep52 和 Rep40 具有解螺旋 酶和 ATP 酶活性，与 Rep78、Rep68 共同参与单链基因组的复制；cap 编码的 VP1、 VP2、VP3是装配成完整病毒所需要的衣壳蛋白，它们在 AAV 病毒整合、复制和装配中起重要作用。

目前AAV具有以下特点：

（1）安全。AAV不参与任何疾病的发生，已经用于临床疾病的治疗；

（2）gao效。病毒滴度高达10 13 以上，组织感染能力超强；

（3）表达周期久。AAV免疫原性低，基因持续表达3-6个月以上；

（4）zui全血清型。可以感染几乎所有的组织和脏器；

（5）组织特异性。拥有zui全的组织特异性启动子工具箱，如心脏、肝脏、 肌肉。

利用AAV无辅助病毒系统（AAV Helper-Free System）可以在无辅助病毒的条件下生产出重组AAV。不同血清型结合不同的启动子，可以实现组织/细胞种类的特异性表达。下图是使用不同血清型AAV原位注射小鼠肝脏，呈现出不同的荧光强度，表明不同血清型对肝脏的噬性不同。

图2 不同血清型AAV感染小鼠肝脏