实验室—大小鼠动情周期的鉴定

啮齿类成年雌性动物生殖器官表现出周期性变化的过程称为动情周期，可分为四个阶段—动情前期、动情期、动情后期和动情间期。

其中大鼠发情前期平均14h，发情期持续24-48h，发情后期6-8h，发情间期48-72h；小鼠发情前期平均10h，发情期持续大约42h，发情后期大约12h，发情间期48-72h。

大鼠阴道内容物提取方法介绍：

1.冲洗法：使用吸取好生理盐水的注射器连接橡胶皮头，将橡胶皮头缓缓伸入大鼠阴道当中，缓慢推注生理盐水，然后吸出，将生理盐水（阴道冲洗液）滴加在载玻片上；

2.蘸取法：使用消毒棉签，蘸取生理盐水，使棉签头部湿润，然后缓慢插入大鼠阴道当中，深度为0.5cm，慢慢转动，然后将棉签蘸取物涂布在载玻片上，晾干;

3.刮取法：使用光滑的玻璃制小勺或者牛角制小勺，经消毒后，轻轻插入大鼠阴道内，刮取少许阴道壁和阴道内容物，然后将勺内物转移至载玻片上，使用蘸取生理盐水的棉签涂抹均匀。

本文将着重讲蘸取法的操作

先将动物用记号笔标号，然后抓取并固定动物在手心，用细棉签在生理盐水中润湿后轻轻插入阴道约0.5cm，并慢慢转动一下取出，将棉签上的阴道内含物均匀地涂在载玻片上，玻片编号后自然干燥。

注：涂抹棉签的时候，应滚动棉签向前涂抹。

常见的染色观察方法中，有以下三种染色分别是：

1.瑞氏染色：主要成分为酸性伊红和碱性美蓝，混合后氧化变成天青；

2.吉姆萨染色（Giemsa）：吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同；

3.苏木素-伊红（HE染色）:苏 木 精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。此方法较少使用；

4.巴氏染色；

5.邵氏染色。

瑞氏染色操作步骤

1. 加入溶液A 3-5 滴，固定1min。

2.加入溶液B 3-5 滴，轻轻晃动玻片，静置染色 3-5 min。

3.用蒸馏水冲洗，待干，镜检。

吉姆萨染色操作步骤

1.载玻片干燥后，使用甲醇固定5min；

2.使用吉姆萨工作液室温染色10min；

3.使用纯水轻轻冲洗去除表面染液；

4.镜检后在烘箱中烘干；

5.使用二甲苯透明1min，使用中性树胶封片。

吉姆萨、巴氏、邵氏染色示例图